مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام، جلد ۲۹، شماره ۲، صفحات ۴۳-۵۴
عنوان فارسی بهینه‌سازی کشت سلول‌های دندریتیک نابالغ از سلول‌های مغز استخوان موش در شرایط عاری از اندوتوکسین
چکیده فارسی مقاله مقدمه: سلول‌های دندریتیک در مطالعات پایه و همچنین تحقیقات دربارۀ واکسن بسیار اهمیت دارند؛ اما جداسازی و کشت این سلول‌ها به علت تعداد اندک در بافت‌ها، با چالش‌هایی روبروست. با توجه به اینکه روش استانداردی وجود ندارد، در این پژوهش، به برخی از عوامل مؤثر در افزایش بازدهی جداسازی سلول‌های دندریتیک از مغز استخوان موش BALB/c پرداخته‌شده است. مواد و روش‌ها: پس از جداسازی سلول‌های مغز استخوان از فمور و تیبیا و هم‌جواری با سایتوکاین GM-CSF، در روز سوم، نیمی از سلول‌ها به پلیت جدید انتقال داده و در روز پنجم، از اولیگونوکلئوتید CpG برای تحریک سلول‌ها استفاده شد. در روزهای پنجم و هفتم، بقای سلول‌ها و همچنین شاخص‌های فنوتیپی CD11C، MHC-II و CD86 با فلوسایتومتری بررسی گردید. یافته‌های پژوهش: در این مطالعه مشخص شد که حضور اندوتوکسین در مراحل کشت سلول‌های نابالغ، به‌طور معنی‌دار (P< 0.05) سبب کاهش بازیابی سلول‌های دندریتیک می‌شود. علاوه بر این، تعداد کمتر از یک میلیون سلول در پلیت‌های غیرچسبنده سبب بقای بیشتر و بازدهی بالا می‌گردد. انتقال سلول‌ها در روز سوم به پلیت جدید هم به‌عنوان راهکاری برای جلوگیری از بلوغ زودرس سلول‌های دندریتیک و مرگ ناشی از آن معرفی شد. پس از دست‌یابی به سلول‌های نابالغ در مجاورت GM-CSF، می‌توان برای القای مسیر Th1 از اولیگونوکلئوتید CpG در روز هفتم استفاده کرد. اختلاف معنا‌دار (P< 0.05) با کنترل نشان داد که CpG می‌تواند به‌عنوان محرک در القای بلوغ پس از تیمار با GM-CSF به‌کار گرفته شود. بحث و نتیجه­گیری: بهینه‌سازی کشت سلول‌های دندریتیک به لحاظ شرایط مختلف کشت، نقش مهمی در بازدهی بازیابی این سلول‌ها دارد.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله مغز استخوان، سلول‌های دندریتیک، بهینه‌سازی کشت، اندوتوکسین
عنوان انگلیسی Optimized Mouse BMDC Isolation and Culture under Endotoxin-Free Conditions
چکیده انگلیسی مقاله Introduction: Dendritic cells are very important in basic studies and vaccine research, but isolation and culture of these cells face challenges due to their small number in tissues. Since there is no standard method, we addressed some of the factors affecting the efficiency of dendritic cell isolation and culture from BALB/c mouse bone marrow.   Materials & Methods: Bone marrow cells isolated from femur and tibia, were seeded in plates and treated with GM-CSF. On day 3, half of the media was transferred to a new plate with fresh media plus GM-CSF. On day 5, cells were induced with CpG oligonucleotide. Cell survival as well as maturation markers of CD11C, MHC-II and CD86 were investigated by flow cytometry on day 5 (immature cells) and day 7 (mature cells). Ethics code: IR.PII.REC.1395.99   Findings: It was found that the presence of endotoxin in the culture of immature cells, significantly reduces the recovery of dendritic cells (p value < 0.05). Less than one million cells seeded in non-treated 6-well plates and transfer of cells to a new plate on day 3 increased the efficiency of immature cell retrieval by preventing early maturation and premature death. Further treatment of immature cells with CpG on day 7 was used to induce the Th1 pathway. Significant difference (p value < 0.05) with control group showed that CpG induces maturation after treatment with GM-CSF (without IL-4).   Discussion & Conclusions: Optimization of dendritic cell culture in terms of different culture conditions highly impacts the efficiency of immature cell formation and maturation.  
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله Bone marrow, Dendritic cells, Cell culture optimization, Endotoxin
نویسندگان مقاله عاطفه صادقی شرمه | Atefeh Sadeghi Shermeh
Dept of Immunotherapy and Leishmania Vaccine Research, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
گروه تحقیقات انگل‌شناسی، قارچ‌شناسی و ایمونولوژی، بخش ایمونوتراپی و تحقیقات واکسن لیشمانیا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

سیما حبیب زاده | Sima HAbibzadeh
Dept of Immunotherapy and Leishmania Vaccine Research, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
گروه تحقیقات انگل‌شناسی، قارچ‌شناسی و ایمونولوژی، بخش ایمونوتراپی و تحقیقات واکسن لیشمانیا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

عادله تقی خانی | Adeleh Taghikhani
Dept of Immunology, Faculty of Medicine, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
گروه ایمونولوژی، دانشکدۀ علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران

سیما رأفتی | Sima Rafati
Dept of Immunotherapy and Leishmania Vaccine Research, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
گروه تحقیقات انگل‌شناسی، قارچ‌شناسی و ایمونولوژی، بخش ایمونوتراپی و تحقیقات واکسن لیشمانیا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

نگار سید | Negar Seyed
Dept of Immunotherapy and Leishmania Vaccine Research, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
گروه تحقیقات انگل‌شناسی، قارچ‌شناسی و ایمونولوژی، بخش ایمونوتراپی و تحقیقات واکسن لیشمانیا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

نشانی اینترنتی http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-6422-3&slc_lang=fa&sid=1
فایل مقاله اشکال در دسترسی به فایل - ./files/site1/rds_journals/48/article-48-2473673.pdf
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده ایمونولوژی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات