|
|
مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام، جلد ۲۰، شماره ۴، صفحات ۴۹-۶۰
|
|
|
| عنوان فارسی |
طراحی واکنش زنجیره ای پلی مراز(PCR) جهت تشخیص مولکولی باکتری هموفیلوس آنفلوانزا |
|
| چکیده فارسی مقاله |
مقدمه: هموفیلوس آنفلوانزا مهم ترین عامل بیماری مننژیت در نوزادان و کودکان زیر 5 سال است. از این رو تشخیص سریع این عامل ضروری است. مطالعات نشان داده است که روش های مولکولی، تست های اختصاصی برای تشخیص سریع این عامل هستند. هدف این مطالعه، طراحی روش PCR جهت تشخیص سریع باکتری هموفیلوس آنفلوانزا بود. مواد و روش ها: در این مطالعه پرایمر های اختصاصی بر اساس ژن ompp6 طراحی و واکنش PCR راه اندازی شد. جهت ساخت کنترل مثبت استاندارد، محصول PCR در وکتور pTZ57R/T کلون گردید. حضور ژن مورد نظر در T- وکتور به وسیله پروسه های هضم آنزیمی و توالی یابی تایید شد. حساسیـــت واکنش PCR، از طریق تهیه رقت های متوالی 1 به 10 از پلاسمید کنترل مثبت با غلظت اولیه 11 نانوگرم، تعیین شد. ویژگی واکنش با PCR بر روی DNAژنومیک طیفی از باکتری ها ارزیابی شد. یافته های پژوهش: نتایجPCR ، باند مورد انتظار با اندازه 280 جفت بازی را نشان داد. نتایج حساسیت، مشخص کرد که کمترین حد تشخیصی واکنش 317 کپی است. هیچ گونه تکثیری پس از PCRبر روی DNA ژنومیک باکتری های کنترل منفی مشاهده نگردید. این نتیجه ویژگی واکنش PCR را تایید نمود. بحث و نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که PCR ژن ompp6 باکتری هموفیلوس آنفلوانزا روشی با حساسیت و ویژگی بالا است و می تواند به عنوان ابزاری در تشخیص سریع مننژیت ناشی از این باکتری به ویژه در موارد مصرف آنتی بیوتیک توسط بیمار در آزمایشگاه های تشخیصی باشد. |
|
| کلیدواژه‌های فارسی مقاله |
هموفیلوس آنفلوانزا، تشخیص سریع، PCR |
|
| عنوان انگلیسی |
Design of Polymerase Chain Reaction (PCR) Assay for Influenzae Bacterium Molecular Detection of HaemophilusInfluenzae Bacterium |
|
| چکیده انگلیسی مقاله |
Introduction: Haemophilus influenza (H. influenza) is an important cause of meningitis in infants and children aged less than five years. For this reason the early diagnosis of this bacterium is important. Studies have shown that molecular methods are specific tests for early dete-ction for this agent. The purpose of this study was to design a PCR assay for the rapid detection of H.influenzae bacterium. Materials & Methods: In this study specific primers were designed based on ompp6 gene and polymerase chain reaction (PCR) assay was setup. To create the standard positive control, the PCR product was cloned in pTZ57R/T vector. The existence of the desired gene in the T-vector was confirmed by digestion and sequencing processes. Sensitivity of the PCR assay was determined by preparing a serial tenfold dilutions of the positive control plasmid with starting concentration of 11ng/µl. The Specificity of the assay was verified by using of PCR on the genomic DNA of a variety of bacteria. Findings: PCR results showed a band of the expected size 280bp. Sensitivity results indicated that the limit of detection of the assay was 317 copy numbers. No amplify-ication was observed after PCR in negative control bacteria genomic DNA. This outc-ome proved the specificity of the PCR assay. Discussion & Conclusion: The results of this study showed that the PCR assay is a rapid, highly sensitive and specific test for detection of H.influenzae bacterium. |
|
| کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله |
haemophilus influenzae, rapid detection, PCR |
|
| نویسندگان مقاله |
صدیقه تقی نژاد | s taghinezhad
محمد سلیمانی | m solaimani
امیرحسین محسنی | ah mohseni
کیوان مجیدزاده | k majidzadeh
|
|
| نشانی اینترنتی |
http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-220-44&slc_lang=fa&sid=fa |
| فایل مقاله |
فایلی برای مقاله ذخیره نشده است |
| کد مقاله (doi) |
|
| زبان مقاله منتشر شده |
fa |
| موضوعات مقاله منتشر شده |
میکروبشناسی |
| نوع مقاله منتشر شده |
پژوهشی |
|
|
|
برگشت به:
صفحه اول پایگاه |
نسخه مرتبط |
نشریه مرتبط |
فهرست نشریات
|