مجله دانشگاه علوم پزشکی ایلام، جلد ۲۰، شماره ۴، صفحات ۲۰۰-۲۰۷
عنوان فارسی جدا سازی و استفاده از DNA آپتامرها در تشخیص و شناسائی مورفین
چکیده فارسی مقاله مقدمه : با توجه به ویژگی های قطعات کوچک نوکلئوتید(الیگونوکلئوتیدهای تک زنجیره ای) از جمله تــوانائی آن ها در استفاده ابزاری برای تشخیص بعضی از مولکول های کلیدی تصمیم گرفته شد تا تجربیاتی در رابطه با به دست آوردن یک قطعه DNA که تمایل زیادی در اتصال به مولکول مورفین دارد، حاصل گردد. مواد، روش ها و یافته های پژوهش: برای این منظور ابتدا یک کتابخانه الیگونوکلئوتیدی که شامل دو توالی مشخص 21 و 19 نوکلئوتیدی در دو سر '5 و '3 یک توالی40 نوکلئوتیدی در وسط که از نظر ترتیب اسیدنوکلئیک تصادفی بوده تهیه گردید، با توجه به این که چهار نوع اسیدنوکلئیک وجود دارد و توالی 40 اسید نوکلئیک دارد حدود 1015 زنجیره DNA حاصل گردید که استخر الیگونوکلئوتیدی نام برده شد. پس از تکثیر توسط PCR در معرض مولکول هدف که مورفین بود و به یک بستر ثابت شده بود قرار گرفت و پس از شستشو با یک بافر و خروج زنجیره هائی که به مولکول هدف متصل نشده بودند توسط یک بافر دیگر که توانائی جدا کردن زنجیره های DNA را از مولکول هدف داشتند جدا گردید و این عمل تا 15 مرتبه تکرار گردید. سپس در بار آخر از پرایمر هائی استفاده گردید که در انتهای 5 آن یک مولکول فلورسین قرار گرفت و به وسیله تکنیک فلوسایتومتری کارائی زنجیره برای تشخیص مولکول هدف(مورفین) اثبات کنیم. بحث و نتیجه گیری: مولکول مورفین به واسطه اهمیت آن از نظر اجتماعی، اقتصادی برای دولتمندان کشور، هدفمند انتخاب گرید. در این راستا با استفاده از تجارب دیگر محققین سیستم جداسازی این قطعه نوکلئوتید(الیگونوکلئوتید) طراحی گردید و در نهایت به قطعاتی دست یافتیم که پس از تعیین توالی می توانیم به جای آنتی بادی های مونوکلونال که هم اکنون برای تشخیص مورفین در کیت های سریع به کار می روند استفاده گردد با این تجربه پا به عرصه علوم نانوبیوتکنولوژی می گذاریم که در امتداد آن به استفاده از الیگونوکلئوتیدها در درمان و هم چنین انتقال دارو به سلول های هدف و پیگیری تاثیر دارو بر سلول ها و در نهایت کمک به تصویر برداری خواهیم رسید.
کلیدواژه‌های فارسی مقاله آپتامر، مورفین، سلکس
عنوان انگلیسی Separation and Application of DNA Aptamer for Detection of Morphine
چکیده انگلیسی مقاله Introduction: With regard to the chara-cteristics of single-stranded oligonucle-otides, including their potential for implem-ental use in order to detect some key molec-ules, it was determined to gain experience in obtaining single-stranded DNA (ssDNA) having affinity for binding to morphine molecules. Materials, methods & Findings: An oligo-nucleotide library was prepared, consisting of an 80-nucleotide sequence with fixed length flanked by constant 5′ and 3′ ends, a 19-nucleotide sequence from 3′-end, a 21-nucleotide sequence from 5′-end that serve as primer, and a 40-nucleotide random seq-uence in the middle. Four types of nucleic acid and the 40-nucleotide sequence are mathematically equaled with 1015 DNA chains known as oligonucleotide pool. Af-ter amplification by PCR, the aptamers we-re exposed to the matrix-bound morphine molecules. After rinsing with a buffer and eliminating the chains, not bound to mor-phine molecule, they were separated using washing buffer, having potential to separate DNA chains from the target molecule. This act was repeated 15 times. Lastly, those primers were used in which one fluorescein molecule was placed at its 5′-end and flow cytometry results proved the efficiency of the chain in detection of target molecule (morphine). Discussion & Conclusion: Morphine mol-ecule was chosen due to its social and commercial importance for governments. For this reason, the separation of this nucl-eotide segment (oligonucleotide) was desi-gned by applying the experience of other researchers and some segments were event-ually obtained, which can be utilized inst-ead of monoclonal antibodies in detecting morphine in rapid kits after detection of sequences. Therefore, we enter to nanobi-ology and we will achieve applying olig-onucleotides in treatment, drug delivery into the target molecule, follow up the effect of the drug on cells, and finally help imaging.
کلیدواژه‌های انگلیسی مقاله aptamer, morphine, SELEX
نویسندگان مقاله سعید حیدری کشل | s haidari kashl


غلامرضا بهروزی | gh r behroozi


میر لطیف موسوی | ml mosavi


محمد جواد رسایی | mj rasaee


جعفر سلیمیان | j salimian


اکبر اکبری | a akbari


نشانی اینترنتی http://sjimu.medilam.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-220-61&slc_lang=fa&sid=fa
فایل مقاله فایلی برای مقاله ذخیره نشده است
کد مقاله (doi)
زبان مقاله منتشر شده fa
موضوعات مقاله منتشر شده باکتری شناسی اختصاصی
نوع مقاله منتشر شده پژوهشی
برگشت به: صفحه اول پایگاه   |   نسخه مرتبط   |   نشریه مرتبط   |   فهرست نشریات